Пцр анализ что показывает у кошек

Коронавирусная инфекция кошек вызывает два вида заболеваний:

1. Кишечный коронавирус кошек (ККВК, или FCoV) — у котят приводит к лёгкой или средней по степени тяжести диарее в течение нескольких дней, а взрослые животные как правило являются бессимптомными вирусоносителями. Данный вирус является контагиозным и передаётся главным образом через фекалии.

2. Инфекционный перитонит кошек (ИПК или FIP) — вызывается высоко патогенными штаммами коронавирусов и приводит к развитию различных по тяжести клинических симптомов. Разделяется на два типа: сухой и выпотной перитонит.

FIP и FCoV относятся к РНК-содержащим вирусам из семейства Сoronaviridae. Они относительно устойчивы в окружающей среде (в каловых массах сохраняются до 48 часов при соответствующей температуре), устойчивы в кислой среде; 70%-й раствор спирта инактивирует их в течение 10 минут, эффективны гипохлоридные и другие антивирусные дезинфицирующие средства.

FIP является мутацией FCoV, которая может иногда происходить спонтанно во время инфекции. После мутации FIP проникает в клетки крови моноциты, где реплицируется и разносится с ними по всему организму.

Основным путём внедрения вируса является ороназальный: вирус размножается в носоглотке, миндалинах и клетках кишечника (энтероцитах). Если у кошки есть напряженный иммунный ответ при низкой патогенности вируса, может быть только лёгкий понос или вообще отсутствие клинических признаков. Если же клеточный иммунитет средней степени, то нарушения развиваются медленно, давая начало хроническому сухому перитониту. Если у кошки слабый клеточный иммунный ответ, то острый выпотной перитонит развивается очень быстро. В зависимости от степени поражения сосудов возможно развитие «влажного» (экссудативного, образуется выпот) или «сухого» перитонита (образуются пиогранулёмы в органах брюшной полости).

Еще до появления клинических симптомов и элиминации вируса некоторые кошки становятся устойчивыми вирусоносителями и играют важную роль в эпизоотологии коронавирусной инфекции кошек.

Инкубационный период длится от нескольких недель до нескольких месяцев. Инфекционный перитонит наиболее опасен при групповом содержании кошек, в кошачьих питомниках. Владельцы, решившие взять кошку с улицы или из питомника, при наличии других кошек в доме, должны поместить ее на 2-х недельный карантин в отдельное помещение и обследовать на FIP.

Предварительный диагноз ставится на основании клинических признаков. Часто требуются дополнительные исследования: общеклинический и биохимический анализы крови, анализ выпота брюшной или грудной полости, исследование сыворотки крови животного для обнаружения антител к коронавирусу, метод ПЦР для определения РНК вируса. Также возможна серологическая диагностика этих заболеваний.

Материал для исследования методом ПЦР выбирается в зависимости от клинических симптомов и типа короновирусной инфекции:

• плазма крови в объеме не менее 300 — 500 мкл — при сухом и выпотном FIP;
• асцитная жидкость в объеме не менее 300 — 500 мкл — при выпотном FIP;
• фекалии 5-10 г отбирают в стерильные контейнеры — при FCoV.

Материал доставляют в лабораторию в день взятия или на следующий день, сохраняя при температуре от 2 до 8°С. Допускается хранение вышеперечисленного материала при температуре не выше минус 16 °С в течение 1 нед, при температуре не выше минус 68°С длительно.

Если необходимо длительное хранение фекалий, из них готовят 10-20% суспензию на стерильном физиологическом растворе, центрифугируют при 10-12 тыс об/мин в течение 2 мин., надосадочную жидкость в объёме 400-800 мкл переносят в новую пробирку и добавляют глицерин до концентрации 20% (или другой криопротектор). Допускается хранение надосадосной жидкости при температуре не выше минус 16 °С. Допускается только однократное размораживание образца.

Следует помнить, что при диагностике методом ПЦР возможно появление ложноположительных результатов, связанных с тем, что метод, обладая высокой чувствительностью, может реагировать на вакцинный штамм, поэтому необходимо, чтобы после вакцинации прошло не менее 3-х недель.

Метод ПЦР позволяет идентифицировать небольшое количество короновирусов в асцитной жидкости, плазме или фекалиях. Однако реакция не способна дифференцировать FIP от FCoV. ПЦР эффективна для выявления вирусоносителей, но однократный положительный или отрицательный результат не имеет значения, так как кошки выделяют вирус периодически или они могут быть инфицированы недавно. Чтобы идентифицировать хронических носителей, необходимо получить несколько положительных анализов из фекалий за 8 — месячный период.

Коронавирус кошек обнаружен

• при наличии явных клинических признаков означает, что кошка больна FIP;
• при отсутствии клинических признаков, означает, что кошка инфицирована авирулентным FCoV;
• кошка была инфицирована коронавирусом, элиминировала его, но осталась вирусоносителем;
• животное было недавно привито против коронавирусов.

Коронавирус кошек не обнаружен

• кошка здорова;
• кошка является вирусоносителем и нерегулярно выделяет вирус.

Лабораторная диагностика в практике ветеринарного врача необходима как один из методов правильной постановки диагноза и выявления причины заболевания

Наиболее распространенной услугой лабораторной диагностики в ветеринарии является анализ крови, который помогает определить изменения в общем состоянии животного и функциональные характеристики большинства органов и систем. Общий клинический анализ дает нам возможность определить количественное соотношение основных клеток крови. Биохимический анализ позволяет точно определить функциональное состояние органов.

Помимо исследований крови, среди лабораторных методов в ветеринарии часто выполняется анализ мочи. Общий клинический анализ мочи позволяет оценить функцию почек и других внутренних органов, а также выявить воспалительный процесс в мочевых путях. Оцениваются физико-химические свойства мочи, включающие в себя: цвет, прозрачность, плотность, рН, концентрацию белка, глюкозы, билирубина, уробилиногена, кетоновых тел, нитритов и гемоглобина. Также исследуется осадок мочи на наличие эритроцитов, лейкоцитов, эпителиальных клеток (плоский эпителий, почечный и переходный), цилиндров, бактерий, паразитов, опухолевых клеток, кристаллов и аморфных солей.

Для постановки правильного диагноза при кожных поражениях проводятся исследования соскобов с кожи, трихограммы и посевы с кожи на специальных питательных средах.

Диагностика инфекционных заболеваний кошек

На данный момент более информативным методом лабораторной диагностики инфекционных заболеваний у кошек является ПЦР, ИФА, ИХ.

ПЦР — полимеразная цепная реакция, данный метод позволяет более точно определить возбудителя заболевания даже в сверхмалом количестве патматериала. Срок выполнения анализа от 1 до 3 суток.

ИФА — иммуноферментный анализ, в ходе которого ведется поиск специфических антител в крови животного.

ИХ — иммунохроматографический анализ, основанный на принципе тонкослойной хроматографии и включающий реакцию между антигеном и соответствующем ему антителом в биологических материалах.

Ниже приведена таблица, где указаны заболевания кошек и материал, который исследуется для подтверждения того или иного заболевания.

ПЦР диагностика незаменима в диагностике инфекционных болезней.

Данный метод обладает высокой чувствительностью и позволяет безошибочно выявить возбудителя, причем на ранних стадиях развития болезни. На многие виды анализов нужно всего около 6 часов времени, поэтому уже в день обращения Вы можете получить результаты исследования.

В нашей лаборатории есть собственная ветеринарная лаборатория, которая позволяет проводить самые сложные исследования, не выходя из стен клиники.

ПЦР собаке — незаменимый метод ислледования

Для многих ПЦР диагностика является совсем новым видом исследования, однако в нашей клинике уже давно и успешно проводится ПЦР собаке. Когда речь касается инфекционных заболеваний, очень важно начать лечение как можно скорее. Причем требуется знать истинного возбудителя заболевания, так как многие лекарства являются токсичными, если применяются не по назначению.

В этом случае ПЦР диагностика становится незаменимым методом исследования (при парвовирозе, чуме плотоядных).

ПЦР диагностика имеет множество преимуществ перед другими методами, так как она направлена на поиск непосредственного возбудителя. Кроме того, при этом не наблюдается никаких побочных реакций.

Для анализа пригоден практически любой биологический материал, получаемый от животного, причем одного образца достаточно для анализа сразу на несколько возбудителей.